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核糖核酸酶A(RNAse A)CAS:9001-99-4

核糖核酸酶A(RNAse A)CAS:9001-99-4

核糖核酸酶A(RNAse A)CAS:9001-99-4

核糖核酸酶
核糖核酸酶A;核糖核酸酶I;RNA酶
Ribonuclease A from bovine pancreas
RNase I,RNase A
在25℃、PH5.0 时(Kunitz),1 分钟内,从A0到Af的吸光度的降低值相当于一个单位的活性。A0到Af相当于总转换量,Af是最终吸光度。
极易溶于水。
RNase A的反应条件极广,且极难失活。最稳定pH范围2-4.5,冷藏冻干粉或结冻的酶液可保存数年活力不变。抑制剂有脱氧核糖核酸(竞争性抑制剂)、变性脱氧核糖核酸(比天然的更有效)0.0005mol/LMg2+。
≥60u/mg
白色冻干粉末。
易吸潮,-20℃储存。
1.无辅助因子及二价阳离子存在时,核糖核酸酶的作用可以被胎盘RNA酶抑制剂或氧钒一核糖核苷复合物(vanadyl—ribonuclosidecomplex,VRC)所抑制。
2.酶反应:专一催化核糖核酸的核糖部分3'和 5'磷酸二酯键的裂开,形成具有 2',3'-环磷酸衍生物寡聚核苷酸。
1.从DNA:RNA杂交体中去除未杂交的RNA区;
2.确定RNA或DNA中的单碱基突变的位置。在RNA:DNA 或RNA:RNA杂交体中,若存在单碱基错,可用RNAse A识别并切割。通过凝胶电泳分析切割产物的大小,即可确定错配的位嚣;
3.RNA检测。RNA酶保护分析法是近年来发展起来的一种检测RNA的杂交技术;
4.降解DNA制备物中的RNA分子。
此外,它具有显著的细胞毒性,可以杀灭许多肿瘤细胞系,可以抑制导致艾滋病的HIV-1病毒在细胞中的复制,可以治疗乙肝。
(1)从DNA-RNA或RNA—RNA杂合体中去除未杂合的RNA区。
(2)确定DNA或RNA中单碱基突变的位置(Myers et al.1985,Winter et al.1985)。在此方法中,RNA-DNA或RNA-RNA杂合体上的单碱基错配可被RNA酶A识别并切割。利用含SP5或T7噬菌体启动子的质粒,在体外合成与野生型DNA或RNA互补的32p标记RNA探针,然后与待检含单碱基置换的DNA或RNA退火,所产生的单碱基错配可用RNA酶A切割,通过凝胶电泳分析切割产物的大小即可确定错配的位置。在所有各种可能的单碱基错配中,大约50%可用此法确定。
生化研究;测定核酸的结构;核糖核酸(RNA)序列分析;水解蛋白样品中的RNA;纯化DNA。
通过煮沸能制备无DNase的RNase A。首先将RNase A溶于10mmol/L Tris-HCl(pH 7.5)、15 mmol/L NaCI中配成10mg/ml的浓度,于100°C加热,保持15分钟,缓慢冷却至室温,分装后保存在-20°C。(注:配置方法仅供参考,请根据具体实验要求结合文献进行使用)
1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。
2.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

核糖核酸酶(RNAse A)来源于牛胰脏,是一种内切核糖核酸酶。核糖核酸酶能改变宿主细胞新陈代谢,抑制病毒合成,在体外能抑制流感病毒增殖,在鸡胚内能抑制痘苗、疱疹病毒形成。临床用核糖核酸酶每天肌注180毫克,对治疗流行性脑炎有益。

核糖核酸酶A是内切核糖核酸酶,可特异地攻击RNA.上嘧啶残基的3’端,切割与相邻核苷酸形成的磷酸二酯键。反应终产物是嘧啶3'磷酸及末端带嘧啶3'磷酸的寡核苷酸。无辅因子及二价阳离子存在时,核糖核酸酶A的作用可被胎盘RNA酶抑制剂或氧钒-核糖核苷复合物所抑制。

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