碳酸缓冲液的配置⽅法

缓冲溶液（英⽂：buffer solution）是⼀种能在加⼊少量酸或碱和⽔时⼤⼤减低pH变动的溶液。pH缓冲系统对维持⽣物的正常pH值和正常⽣理环境起到重要作⽤。多数细胞仅能在很窄的pH范围内进⾏活动，⽽且需要有缓冲体系来抵抗在代谢过程中出现的pH变化。在⽣物体中有三种主要的pH缓冲体系，它们是蛋⽩质缓冲系统、重碳酸盐缓冲系统以及磷酸盐缓冲系统。每种缓冲体系所占的分量在各类细胞和器官中是不同的。

在⽣化研究⼯作中，常常需要使⽤缓冲溶液来维持实验体系的酸碱度。研究⼯作的溶液体系pH值的变化往往直接影响到研究⼯作的成效。如果“提取酶”实验体系的pH值变动或⼤幅度变动，酶活性就会下降甚⾄完全丧失。所以配制缓冲溶液是⼀个不可或缺的关键步骤。

常⽤作缓冲溶液的酸类

由弱酸及其共轭酸盐组合成的溶液具有缓冲作⽤。⽣化实验室常⽤的缓冲系主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴⽐妥酸、Tris（三羟甲基氨基甲烷）等系统，⽣化实验或研究⼯作中要慎重地选择缓冲体系，因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值，⽽是缓冲液中的某种离⼦。如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲剂都可能产⽣不需要的化学反应。

硼酸盐：硼酸盐与许多化合物形成复盐，如蔗糖。

柠檬酸盐：柠檬酸盐离⼦容易与钙结合，所以存在有钙离⼦的情况下不能使⽤。

磷酸盐：在有些实验，它是酶的抑⽌剂或甚⾄是⼀个代谢物，重⾦属易以磷酸盐的形式从溶液中沉淀出来。⽽且它在pH7.5以上时缓冲能⼒很⼩。

三羟甲基氨基甲烷：它可以和重⾦属⼀起作⽤，但在有些系统中也起抑制作⽤。其主要缺点时温度效应。这点往往被忽视，在室温pH是7.8的Tris缓冲液，4℃时是8.4，37℃时是7.4，因此，4℃配制的缓冲液在37℃进⾏测量时，其氢离⼦浓度就增加了10倍。在pH7.5以下，其缓冲能⼒极为不理想。